藥物細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

   吉奧藍(lán)圖（廣東）生命科學(xué)技術(shù)中心 核心項(xiàng)目為“PDX模型、動(dòng)物疾病模型及3D類器官在抗腫瘤新藥研發(fā)、臨床個(gè)體化治療中的應(yīng)用"，目前擁有各類細(xì)胞株/系近千株，PDX腫瘤異體移植活體標(biāo)本庫近200個(gè)，已經(jīng)具備相當(dāng)規(guī)模，可滿足各類抗腫瘤新藥的篩選需求；自主研發(fā)的NOD-Rag2null IL-2Rynull免疫缺陷鼠獲得發(fā)明受理，是PDX模型建立的關(guān)鍵因素，能有效提高成瘤率?？蛇M(jìn)行自我繁育，極大降低了PDX模型在抗腫瘤新藥研發(fā)及臨床個(gè)體化治療中應(yīng)用的成本。

藥物細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

      吉奧藍(lán)圖（廣東）生命科學(xué)技術(shù)中心 是一家立足于生物醫(yī)藥技術(shù)研發(fā)，服務(wù)于各大科研院校、醫(yī)院和藥企，致力于臨床轉(zhuǎn)化和產(chǎn)業(yè)化應(yīng)用的高新技術(shù)公司，公司建立(國內(nèi)*規(guī)模的細(xì)胞-動(dòng)物半臺(tái)，其中細(xì)胞半臺(tái)涵需各類止常/腫痛細(xì)胞株、耐藥株、熒光示蹤細(xì)胞、原代細(xì)胞、基因敲除細(xì)胞等近千種，并且提供豐富的細(xì)胞功能學(xué)檢測(cè)服務(wù);血管生成實(shí)驗(yàn)。 

     一、正常/腫瘤細(xì)胞株

          各類常規(guī)細(xì)胞株，干細(xì)胞，腹水瘤細(xì)胞

     二、耐藥株

        本驗(yàn)室耐藥株儒選都為梯度遞增，間數(shù)作用法話導(dǎo):現(xiàn)對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的糾胞接種至*培養(yǎng)液中，從低濃度

(0.1nmol/ml或者0.1ua/ml)開始，作用48小時(shí)后棄去含藥培養(yǎng)液，加入含15%血潔的新鮮培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)，待其恢復(fù)正常生長(zhǎng)，密度達(dá)到70%以后消化傳代，然后重復(fù)上試提作，換液，傳代，根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)情況，逐步提高藥物濃度間數(shù)誘

早，最終薦但耐受指數(shù)為敏咸株8-10倍以上的細(xì)胞系，并能穩(wěn)定維持培養(yǎng)在1/41C50藥物濃度的宗全培養(yǎng)液中。

三、熒光示蹤細(xì)胞

       熒光示蹤細(xì)胞有部分現(xiàn)貨，客戶可根據(jù)自己需要進(jìn)行定制。

     1、表達(dá)熒光的慢病毒制備

     2、以MOI50病毒轉(zhuǎn)染細(xì)

     3、病毒轉(zhuǎn)染48小時(shí)后，換培養(yǎng)基，加嘌呤霉毒8yg/ml持續(xù)培養(yǎng)

     4、2-3天換液一次，洗掉死亡廣的細(xì)胞，待存活細(xì)胞牛長(zhǎng)到30-40%密度后 消化按昭每 10細(xì)胞接種96孔板

     5、培養(yǎng)6-8天，選擇形成較好的克降團(tuán)10-20個(gè)挑選出后轉(zhuǎn)移到24引板培養(yǎng)

      6、細(xì)胞密度到達(dá)80%后轉(zhuǎn)移到6CM并月加嘌呤霉毒5ua/ml培養(yǎng)傳代1-2次(期間有死廣細(xì)胞換液洗掉)

      7、用D-熒光素鈉鹽或者PCR檢測(cè)熒光表達(dá)情況

      8最終陽性克隆紙胞穩(wěn)定夷達(dá)熒光 并目持續(xù)存活在3-4110 ml吧呤毒表的培養(yǎng)其中

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